Základné metódy prietokovej cytometrie

Prietoková cytometrie zahŕňa princíp hydrodynamické zaostrovanie , pri použití svetelného zdroja , ako je excitačné laser , pre meranie a analýzu fyzikálne vlastnosti jednotlivých častíc . Prietoková cytometria je prevažne používať pre analýzu buniek , a vlastnosti sú analyzované veľkosti buniek , rozlišovacia schopnosť a intenzitu fluorescencie . Základné metódy detekcie používané v prietokovej cytometrie patrí dopredu , rozptýlené svetlo , bočné rozptýleného svetla a fluorescenciu . Prietokový cytometer

prietokový cytometer je sa skladajú z Fluidná , optiky a elektroniky systému . Fluidný systém je zodpovedný za transport vzorky prúdu do laserového lúča pre dotazovanie . Optický systém obsahuje lasery a optické filtre , ktoré osvetľujú vzorky a priame svetelné signály na príslušné detektory . Tento zistený svetlo sa premení na elektronické signály pomocou elektronického systému , výkladu počítača .
Forward - Rozptýlené svetlo

odrazené svetlo rozptýlené v doprednom smere je detekovaný približne 20 ° od osi z laserového lúča fotodiódy volal dopredu rozptýlené kanál ( FSC ) . Forward - rozptýleného svetla je priamo úmerná povrchu častíc , a používa sa ako indikátor veľkosti buniek a rozlišovať medzi živých a mŕtvych buniek . Vďaka týmto vlastnostiam , FSC je aplikovaný na imunofenotypizácie ako spúšť spracovanie signálu .
Side rozptýleného svetla

Side - rozptýlené svetlo odkazuje na svetlo láme na každý mobilný rozhrania , ktorý sa meria pri približne 90 ° od osi laserového lúča , ktoré side - scatter kanála ( SSC ) , potom presmerovaný na príslušnú detektore rozdeľovačom lúčov . Side - rozptýlené svetlo je približne ekvivalentná buniek zrnitosti alebo vnútornej zložitosti , a slúži na určenie granulové obsah buniek . Bočné a predné rozptýleného svetla sa používa v kombinácii so rozlišovať medzi rôznymi typmi buniek .
Fluorescenčné

fluorescencie poskytuje ako kvantitatívne a kvalitatívne informácie o intracelulárnych molekúl , ako sú cytokíny a DNA a bunkové povrchové receptory , pomocou fluorochrómy štítkov a meranie pri rôznych vlnových dĺžkach . Každý fluorochrómy štítok má špecifickú vlnovú dĺžku , pri ktorej je zavolal svetla absorbovaného nazýva absorpčné spektrum . Fluorescenčné funguje ako fotón svetla je vyžarované excitovaného elektrónu následnou k absorpcii svetla .